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TUhjnbcbe - 2021/8/6 0:56:00
我国知名白癜风专家 http://m.39.net/news/a_5941620.html
目的:规范HbsAb检测的操作范围:检验科免疫实验室责任人:免疫实验室专业组长及工作人员应用仪器:酶标仪检测原理:样品加入在微孔条上预包被纯化乙肝表面抗原(HbsAg)的反应孔中,在随后的温育的过程中,若样品中含有乙型肝炎病*表面抗体(HbsAb),则该抗体与包被抗原形成抗原—抗体复合物被吸附到固相上,再加入酶标记抗原(HbsAg—HRP),最终形成抗原—抗体—酶标抗原复合物,洗涤除去未结合的游离酶,加入显色剂(TMB)后显色。试剂品牌:速显乙型肝炎病*表面抗体诊断试剂盒标本收集:1、最好使用新鲜血清样本,如需保存,可置2-8℃冷藏48小时或-20℃冷冻4周。2、避免使用溶血、浑浊或脂血样本及反复冻融样本。试剂规格:每盒96人份试剂盒组成:1、HbsAb微孔板2、HbsAb酶标记抗体3、HbsAb阳性对照血清4、HbsAb阴性对照血清5、浓缩洗涤液6、底物A7、底物B8、终止液(2MH2SO4)9、封口膜10、自封袋操作步骤:1、加样待测标本50ul,设阴、阳对照各1孔,阴、阳对照各加1滴,并设定空白对照孔1孔。2、加酶酶结合物1滴(空白孔除外),充分混匀,封板。3、温育混匀置C温育30分钟4、洗涤弃去孔内液体将稀释后的洗液注满各孔静置30-60秒弃去孔内液体,扣干重复6次5、显色每孔加底物缓冲液50ul再加底物液50ul混匀,置C温育15分钟6、终止每孔加入终止液1滴,混匀,用酶标仪取波长ul读取各孔OD值。结果判定:1、临界值(C.O.)的计算:临界值=阴性对照孔OD均值N×2.1阴性对照OD均值大于0.1时应重新实验,小于0.05时以0.05计算。2、结果判定:样品OD值S/C.O.≥2.1者为HbsAb阳性样品OD值S/C.O.2.1者为HbsAb阴性目测:蓝色为阳性,无色为阴性。注意事项:1、冷藏环境中取出的试剂盒应平衡至室温后方可使用。2、使用的预包被板条应置于封口袋,2~8oC保存。3、若20倍浓缩洗液出现结晶,请放置37oC至溶解。4、滴加试剂时,应先摇匀,并弃去1~2滴后,垂直滴加。5、洗涤时各孔均需加满洗液,防止孔口有游离酶不能洗净。6、结果判读请在15分钟内完成。7、不同批号的试剂组份不可混用。8、试剂盒应按含有传染性材料对待。参考范围:阴性临床意义:抗-HBS(HbsAb)是HBsAg刺激人体产生的特异性抗体,是针对HBV的保护性抗体,能中和体液中的HBV。其阳性的意义为:(1)表明曾感染过HBV,是已恢复的标志;(2)对HBV有中和作用,目前尚未发现患2次急性乙肝的情况。接种疫苗之后血液中产生HbsAb,对HBV感染有一定的防护作用。但HbsAb的保护作用并不是完全的,绝对的,若其滴度低,或病*攻击量大时,仍可感染。

见附表:“常见乙型肝炎标志物五项检测结果与临床意义”

序号

HBsAg

HBsAb

HBcAb

HBeAg

HBeAb

临床意义

1

过去和现在未感染过HBV。

2

+

(1)既往感染未能测出抗-HBs;

(2)恢复期HBsAg已消,抗-HBs尚未出现;

(3)无症状HBsAg携带着。

3

+

+

(1)既往感染过HBV;

(2)急性HBV感染恢复期;

(3)少数标本仍有传染性。①HBV感染已过;②抗HBs出现前的窗口期。

4

+

(1)注射过乙肝苗有免疫;

(2)既往感染;③假阳性

5

+

+

+

急性HBV感后康复。

6

+

+

(1)急性HBV感染;

(2)慢性HBsAg携带者;

(3)传染性弱。

7

+

+

既往感染,仍有免疫力。HBV感染,恢复期。

8

+

+

+

(1)急性HBV感染趋向恢复;

(2)慢性HBsAg携带者;

(3)传染性弱。即俗称的“小三阳”。

9

+

+

+

急性或慢性乙型肝炎感染。提示HBV复制,传染强。即俗称的“大三阳”。

10

+

(1)急性HBV感染早期,急性感染潜伏期;

(2)慢性HBV携带者,传染性弱。

11

+

+

(1)慢性HBsAg携带者易转阴;

(2)急性HBV感染趋向恢复。

12

+

+

急性HBV感染早期或慢性携带者,传染性强。

13

+

+

+

+

(1)急性HBV感染趋向恢复;

(2)慢性携带者。

14

+

+

(1)亚临床型HBV感染早期;

(2)不同亚型HBV二次感染。

15

+

+

+

(1)亚临床型HBV感染早期;

(2)不同亚型HBV二次感染。

16

+

+

-

+

亚临床型或非典型性感染。

17

+

+

+

+

亚临床型或非典型性感染。

18

+

+

+

+

亚临床型或非典型性感染早期。HBsAg免疫复合物,新的不同亚型感染。

19

+

(1)非典型性急性感染;

(2)见于抗-HBc出现之前的感染早期,HBsAg滴度低而呈阴性,或呈假阳性。

20

+

+

非典型性急性感染。

21

+

+

+

急性HBV感染中期。

22

+

+

HBV感染后已恢复。

23

+

+

非典型性或亚临床型HBV感染。

24

+

+

+

非典型性或亚临床型HBV感染。

25

+

急性HBV感染趋向恢复。

26

+

+

+

+

+

①一种亚型的HBsAg及异型的抗HBs(常见);

②血清从HBsAg转化为抗HBs的过程(少见)。

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